1、Q: 支原體污染對(duì)細(xì)胞有什么危害？
A: 支原體污染后，不會(huì)使細(xì)胞死亡可以與細(xì)胞長(zhǎng)期共存，培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁，細(xì) 胞無(wú)明顯變化，外觀上給人以正常感覺(jué)，實(shí)則細(xì)胞收到多方面潛在影響，如引起細(xì)胞變形， 影響 DNA 合成，抑制細(xì)胞生長(zhǎng)等，以致影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可信度。
2、Q: 支原體污染有什么特征？
A: 細(xì)胞狀態(tài)變差,生長(zhǎng)變慢，在顯微鏡下觀察可能會(huì)有小黑點(diǎn)，但培養(yǎng)基一般不發(fā)生 渾濁。細(xì)胞傳代以后就出現(xiàn)細(xì)胞間黑點(diǎn)，細(xì)胞空泡化，很多類似凋亡、壞死的細(xì)胞，終細(xì)胞漂浮，*死亡。
3、Q: 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，顯微鏡下的小黑點(diǎn)是什么？
A: 支原體污染后，細(xì)胞凋亡壞死，釋放出大量碎片，看起來(lái)就像小黑蟲子。
4、Q: 細(xì)胞通過(guò)何種途徑感染支原體？
A: 支原體污染的來(lái)源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染（某些支原體在人體是正常菌群如口腔中的支原體）、培養(yǎng)基的污染、被污染細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材的污染、制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染等等，由于支原體大小為 0.1~0.8 um，無(wú)細(xì) 胞壁，可透過(guò)一般過(guò)濾膜（0.22-0.45 um），血清中也可能含有支原體。
5、Q: 支原體污染如何檢測(cè)？
A: 利用支原體具特殊專一性之 primers，經(jīng)由 PCR 反應(yīng)來(lái)復(fù)制支原體 DNA。所用 primers 來(lái)自支原體的 conserved 16S-23S rRNA 序列，由于此段序列依支原體種類不同而不同， 因此可依所復(fù)制之 DNA大小及其 restriction fragment 大小差異來(lái)作偵測(cè)與鑒定支原體。
6、Q: 如何清除支原體？
A: 由于市場(chǎng)同類產(chǎn)品都為抗生素類，對(duì)細(xì)胞本身也會(huì)產(chǎn)生一定影響，而且有反復(fù)發(fā) 作的風(fēng)險(xiǎn)，吉銳生物推出的 MycoplasmaOUT?Treatment，活性成分為抗菌肽，經(jīng)多方測(cè)試表明對(duì)大部分細(xì)胞無(wú)毒害作用，因其*的作用原理，支原體不會(huì)對(duì)其產(chǎn)生耐藥性，并且其作用時(shí)間短，在三天內(nèi)就可殺滅支原體，并自動(dòng)降解成氨基酸，不會(huì)對(duì)細(xì)胞造成二次污染。
7、Q: 為什么在培養(yǎng)細(xì)胞前要加入MycoplasmaOUT? Prevention？
A：由于支原體污染后能夠進(jìn)入細(xì)胞，而MycoplasmaOUT? Prevention不能夠進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)也就不能殺滅已經(jīng)進(jìn)入細(xì)胞的支原體，而這部分細(xì)胞死亡時(shí)會(huì)釋放其內(nèi)部的支原體，需要MycoplasmaOUT?Prevention來(lái)殺滅新釋放出的支原體，以防止新生細(xì)胞受到污染。
8、Q: 所謂的黑膠蟲污染？
A:
上述現(xiàn)象很像所謂的“黑膠蟲"。我感覺(jué)實(shí)際是支原體感染以后細(xì)胞生長(zhǎng)不好造成的碎片和感染原蟲（現(xiàn)在看來(lái)是些胞外囊泡）的混合體。這種現(xiàn)象的直接原因是支原體等原蟲感染，間接表象是小黑點(diǎn)，被誤傳為“黑膠蟲"。
光鏡下看不到支原體，但是可以看到支原體感染的終末現(xiàn)象——細(xì)胞凋亡壞死，釋放出大量碎片，看起來(lái)就像小黑蟲子。
查找類似的帖子——很多人是更換血清后出現(xiàn)這種問(wèn)題；
說(shuō)空氣傳播的可能是一個(gè)培養(yǎng)箱的人都用了同一種血清，而不是可以通過(guò)培養(yǎng)箱空氣傳播；感染可能是牛源性的支原體，通過(guò)產(chǎn)道或血行感染。
所謂“細(xì)胞生長(zhǎng)不受影響"，其實(shí)是污染的嚴(yán)重程度不高而已；
支原體污染嚴(yán)重就出現(xiàn)細(xì)胞大量空泡形成，細(xì)胞間空曠地帶出現(xiàn)大量黑點(diǎn)，細(xì)胞終凋亡、壞死，漂起來(lái)。有些國(guó)產(chǎn)血清寫著建議滅活，其實(shí)是掛羊頭賣狗肉，那個(gè)56度30分鐘更多的是為了殺殺支原體的。實(shí)際上還有很多殺不死的。但可以降低產(chǎn)品支原體等微生物污染風(fēng)險(xiǎn)。用抗生素殺支原體，小黑點(diǎn)可以得到抑制，不過(guò)我想*就很難了，而且處理時(shí)間很長(zhǎng)，少一個(gè)星期。
抗生素可以抑制細(xì)菌細(xì)胞壁及蛋白合成，支原體沒(méi)有細(xì)胞壁，而且對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有一定影響，所以不建議用抗生素殺支原體。
抗菌肽產(chǎn)品殺支原體，是利用物理的方式，支原體和細(xì)菌表面帶有正電荷，我們的抗菌肽表面帶有負(fù)電荷，通過(guò)電荷間的引力作用，抗菌肽和支原體特異性結(jié)合，通過(guò)細(xì)胞膜的融合作用，可以在支原體表面類似打孔的方式，使得支原體裂解死亡。
摘自小木蟲網(wǎng)，作者：小刀188
版權(quán)所有 ICP備案號(hào): 管理登陸 技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 總流量：1031847 網(wǎng)站地圖
